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酶底物法检测系统介绍
添加时间:2017-08-14
  

一、 酶底物法检测系统用途:

 
酶底物法测定用途:用于检测水中总大肠菌群粪大肠菌群(耐热大肠菌群)和大肠埃希氏菌。可用于检测水的类型:饮用水、水源水、废水、食品水、地表水、地下水、海水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、畜牧用水、医疗用水等。
 

二、 酶底物法检测系统原理:


 
酶底物法采用 ONPG 和 MUG 两种营养指示剂,这两种试剂分别可以被大肠菌群的β-半乳糖苷酶和大肠杆菌的 β-葡糖醛酸酶分解代谢。当大肠菌群在酶底物检测试剂中生长时,其使用 β-半乳糖苷酶分解代谢 ONPG,并使样品从无色变为黄色。大肠杆菌使用 β-葡糖醛酸酶分解代谢 MUG 时,能够发出荧光。
 

三、 酶底物检测系统优势特点:

 
酶底物法为GB5750-2006收录的用于大肠杆菌检测标准方法,酶底物法是目前水中大肠杆菌检测的最先进方法,目前在发达国家水质大肠菌群检测分别占到95%和90%的市场,以其方便快捷,假阳性低,适用大量样品快速检测等优点正逐步被国内检测部门所认可。
 
相对于多管发酵和滤膜法,酶底物法检测步骤大大减少,而且对实验环境要求不高,检测时间可减少到24小时,在日常水样监测及应急监测中具有很好的应用前景,可及时检测,预防,最大限度的减少重大公共安全事故的发生几率。 以GB5750-2006中总大肠菌群测定为例,比较三种方法,如表所示。
 
表1 多管发酵法、滤膜法及酶底物法比较统计
 

方法优势:

 
1.无需在无菌室内操作。
 
2.手工操作时间小于1分钟。
 
3.无需培养基制备和大量玻璃器皿灭菌。
 
4.24小时即可完成定性定量分析,无需验证试验。
 
已经列入
 
1.GB/T5750.12-2006《生活饮用水标准检验方法》微生物指标。
 

四、酶底物法检测系统产品特点:

 
1.colitech酶底物法检测试剂,LK定量检测盘/定量孔板,LK定量瓶出厂前均已灭菌,客户可以直接放心使用。
 
2.colitech酶底物法检测试剂是我公司潜心研制并符合GB/T5750.12-2006的酶底物法培养基,假阳性和假阴性均优于传统方法。
 
3.colitech酶底物法检测试剂经大量客户实验室使用和验证,表明与传统方法多管发酵法和滤膜法具有方法一致性和可比性。
 

准确/可信

 
● 使用MPN法进行定量检测,可直接检测100毫升水样中1~2419MPN(个)目标细菌
 
● 精确检出100ml水样中单个的活性大肠杆菌群和大肠埃希氏菌,假阴性低
 
● 每个单位试剂可抑制上百万个异养细菌,假阳性低
 
● 无需验证试验,准确性高于滤膜法及多管发酵法
 
● 符合中国国家标准GB/T5750.12-2006《生活饮用水检验标准》
 

简单/快捷

 
● 检测时间不超过24小时,无需确证试验
 
● 简单培训就能轻松使用,手工操作少于一分钟
 
● 不会因为过滤阻塞(滤膜法)或异养细胞的干扰(多管发酵法)而产生数据误差 ● 无需玻璃器皿清洗及菌落计数,减轻实验人员工作量
 
● 适用于大量样品的批量快速检测 四、 配件以及技术方案:
 
针对酶底物法检测的原理采购相应的设备。用途如下:
 
程控定量封口机:用于定量检测盘的封口。
 
酶底物检测试剂:用于选择性检测水中的目标细菌。
 
51或97定量检测盘:用于判断目标微生物数量。
 
100毫升定量瓶/取样瓶:专业的为水样与试剂提供溶解环境。
 
紫外手持式紫外分析仪带暗室:测定大肠埃希氏菌时用于在暗室中观察荧光。
 

五、 酶底物法检测系统操作方法:

 
第一步:将水样加入100ml取样瓶中,加入酶底物法检测试剂,拧紧盖子摇匀至完全溶解。
 
第二步:将样品加到定量检测盘中。
 
第三步:使用程控定量封口机对定量检测盘进行样品分配及封口
 
第四步:将封口好的定量检测盘放在36±1℃,如需测定粪大肠菌群(耐热大肠菌群)则将培养箱设定为44.5℃,培养24h.
 
第五步:对照比色盘数阳性(显黄色,或荧光)格子数,按照使用的检测盘类型,分别查51孔或者97孔MPN表得出100毫升中大肠菌群的菌群数。对照MPN表出数据。
 
第六步:根据稀释倍数最终结果按公式计算结果
 
大肠菌群(个/L)=MPN值×稀释倍数×1000mL/100mL
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