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大肠菌群检测的新型方法酶底物法
添加时间:2017-09-21
  
  粪大肠菌群能够在45℃左右的环境中生存,产气产酸,其主要来源于人和动物的粪便,能够导致肠道性疾病的传播,是进行水质检测的重要指标,所以,更好的优化粪大肠菌群检测有着较为重要的医学意义。其中酶底物法为现阶段粪大肠菌群检测的新型方法之一,具有快速、精确及可靠的检测优势,能够及时的将水体的污染情况反应出来。
 

  酶底物法介绍

 
  酶底物法为利用粪大肠菌群在45℃左右生长过程中产生的半乳糖苷酶与葡萄糖醛酸酶,分解培养基中所含的葡萄糖醛酸与半乳糖苷,从而使整个培养基呈现出黄色与发生荧光反应,根据最终的阳性组合,查阅MPN表而得出粪大肠菌群的数量。在实际操作的过程中,检测人员首先应当根据污染的程度对需检测的水样进行适当性的稀释,然后取100ml的水样加入到无菌瓶中,再向其中加入酶底物法试剂,摇匀,然后将其倒入97孔定量盘中,放置于45℃的培养箱中,连续培养24小时,最后根据实际的阳性孔数,通过查MPN表进行计算。
 
  酶底物法与其他方法比较现阶段我国使用的粪大肠菌群检测方法主要为国外早期使用的实验方法—滤膜法和MPN法为主,同时随着现代化生物监测技术的发展,纸片法、分子生物鉴定法及固定酶底物法在很多方面得到一定的应用,各种方法比较如表1所示。
 

  简单操作降低人为污染

 
  从粪大肠菌群检测的实验操作方面来讲,酶底物法采用了取药封口的培养方式,相对于其他检测方面过程较为简单,降低了人为污染带来的影响,特别是纸片法,其操作过程虽然也较为简单,但是其操作过程中交易受到人为的污染,此外还需要进行确认实验。
 

  酶底物法的准确性

 
  从实验的结果方面来分析,酶底物法使用的97孔定量盘所包含的数表能够达到近2400组,远远大于其他检测方法,因此其检测的结果更为准确。酶底物法使用了酶技术对粪大肠菌群进行了检测,出现假阳性与假阴性的现象非常少,这在很大程度上能够提升粪大肠菌群检测的准确性。
 

  酶底物法的应用

 
  粪大肠菌群为一种卫生学指标,在很多行业内均有着较为严格的要求,其中酶底物法在粪大肠菌群检测标准中的应用如表2所示。从上表2中可以看出,现阶段我国对粪大肠菌群的检测标准多数情况下为发酵法,并没有对酶底物法进行规定性使用,由此可知,在今后进行粪大肠菌群的检测时,将酶底物法应用到粪大肠菌群的检测试验中,在很大程度上能够弥补我国在粪大肠菌群检测方面使用酶底物法的空白,同时在很多程度上也为更好的提升我国粪大肠菌群的检测的准确性打下了良好的基础。
 
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